抽气型厌氧罐通过真空抽吸与气体置换技术，为厌氧微生物培养提供稳定无氧环境，广泛应用于微生物学研究、临床诊断及工业发酵领域。其操作需严格遵循标准化流程，确保实验结果的准确性与可重复性。以下从设备准备、抽气换气、培养操作到结果分析，解析
抽气型厌氧罐的核心使用方法。
一、设备预检与培养基准备
1.罐体检查：确认罐体密封圈无破损，夹具滑动顺畅，快速插拔接口无污渍。使用前用75%乙醇擦拭罐体表面，禁用酒精直接接触罐盖凹槽。
2.培养基配置：选择中性红琼脂或玉米醪琼脂培养基，融化后冷却至45℃±2℃，倒入无菌培养皿中，厚度约3mm。若使用一次性平皿，需选择透气性良好的材质。
3.指示剂与催化剂准备：将美蓝指示剂管、钯粒催化剂管（140℃活化2小时）及吸湿剂包（变色硅胶）放入罐内，用于监测氧浓度与湿度。
二、抽气换气操作
1.装罐密封：将接种有厌氧菌的平板正置放入罐内支架，避免倒置导致平板脱落。快速旋紧罐盖夹具，确保定位杆与凹槽对齐，旋紧至阻力增大后微调即可。
2.真空抽吸：连接真空泵与罐盖抽气接口，启动真空泵，抽至负压0.09-0.093MPa（680-700mmHg），用止血钳夹紧橡胶管暂停抽气。
3.气体置换：
①氮气冲洗：打开氮气钢瓶阀门，缓慢充气至真空表归零，关闭阀门并夹紧橡胶管，重复抽气-充气操作2-3次。
②混合气体充入：按N2:CO2:H2=80:10:10（V/V）比例分步充气。先充N2至0.021MPa，再充CO2至0.011MPa，最后用医用氧气袋灌装H2充至零压。H₂需经钯粒催化与残余O2反应生成水，确保无氧环境。
三、培养与监测
1.恒温培养：将厌氧罐置于37℃恒温箱中，培养时间根据菌种特性而定（如丙酮丁醇梭菌需5-7天）。
2.氧浓度监测：每24小时观察美蓝指示剂颜色变化，若指示剂保持无色，则证明无氧环境稳定。
四、结果分析与设备维护
1.菌落观察：培养结束后，取出平板观察菌落形态。丙酮丁醇梭菌在中性红平板上呈黄色菌落，需挑取典型菌落进行镜检。
2.罐体清洁：用中性清洁剂擦拭罐体，避免划伤密封圈。定期涂抹无酸凡士林或硅酮油脂保养密封圈，延长使用寿命。
抽气型厌氧罐通过精准的抽气换气操作，为厌氧微生物研究提供了可靠工具。严格遵循操作规程，可显着提升实验成功率，助力微生物学与生物技术领域的发展。
